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阳性质控可以用样本代替么?

更新时间:2023/6/26 16:06:51 浏览次数:5601
阳性质控可以是简单的,如在无脱氧核糖核酸酶(DNase)/核糖核酸酶(RNase)的水(或适当的缓冲液)中连续稀释的纯化的目标核酸,替代样品或已知含有目标核酸的患者标本。以下类型的阳性质控在测定开发过程中需要,并有可能在方法实施后被纳入常规质量对照:
 ➤  弱阳性质控:低浓度的生物或目标核酸,其浓度接近测试的预期检测限,或临床上需要的相关检测水平。
✔  如果病毒或其他强制性的细胞内生物是目标病原体,可以使用被感染的细胞(例如,淋巴细胞)。这样的对照应该在测试系统中进行微弱的扩增或杂交,但要保持一致。对于复式系统,可能需要包括多个低阳性质控,以避免竞争性抑制。这些对照应处于或接近估计的LoD,用于鉴定新试剂、评估稳定性和测定参数的影响。如果使用细胞系,它们应该由感染和未感染的细胞组成,其比例与临床样品中的预期比例相似。
 ➤  患者标本或实验室样品,已知含有与临床感染过程有关的目标生物及其变体(基因型和表型)。
 ➤  替代阳性质控,通过在标本中「添加」不同水平的目标生物或目标核酸,而这些标本已被证明对目标生物或核酸是阴性的。
✔  这些设计应近似于临床样品中的基质和预期的生物水平。注意在可行的情况下,应使用非病毒性菌株(例如,结核杆菌H37Ra)。


 

任何质控物质中的目标核酸,无论是来自于患者样品还是替代品(人工制造),都会随着时间的推移而降解。由于核酸酶、冻融循环或其他影响,质控物质可能发生降解。一般来说,质控物质存档的时间越长,样品中可用的目标核酸的数量就越少。根据对照品的稳定性,可能需要定期开发新的对照或从制造商那里重新供应对照。



参考文献


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[2] Millar BC, Xu J, Moore JE. Risk assessment models and contamination management: Implications for broad-range ribosomal DNA PCR as a diagnostic tool in medical bacteriology. J Clin Microbiol. 2002;40(5):1575-1580.

[3] Dowell SF, Peeling RW, Boman J, et al, and the C. pneumoniae workshop participants. Standardizing Chlamydia pneumoniae assays: Recommendations from the Centers for Disease Control and Prevention (USA) and the Laboratory Centre for Disease Control (Canada). Clin Infec Dis. 2001;33(4):492-503.

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