新冠疫情不断蔓延，核酸检测在疫情的防控中发挥着至关重要的作用。为了监测「提取、扩增」等环节，目前市场上已有多个产品均在核酸扩增试剂内加入了「内标」，包括「内源性内标」和「外源性内标」，两种方式各有利弊。

「内源性内标」的一个优势就是可监测「采样」[1]。这样的说法并不能完全囊括所有的临床场景；例如：在「单检」过程中，内源性内标仅能监测采集到足够人体细胞，不能判断采样部位是否正确；其次，在大规模「混检」中，标本漏检也难以发现。

因此，在实际工作中应根据实际情况，选择合适的试剂；并且无论使用哪种内标的扩增试剂，都需要保证采用过程的规范化。

「内标」、「内源性内标」和「外源性内标」是什么

在检验工作中，如 PCR 扩增靶标基因扩增呈现「阴性」，存在哪些可能性呢？

可能受试者为「真阴性」，也可能是由于采样、提取和扩增阶段存在问题，导致的「假阴性」[2]。各个厂家为了减少「假阴性」的发生率，通过改变核酸扩增试剂的配置，可通过检测内标核酸是否「起线」，判断是否存在「采样、提取、扩增」导致的假阴性。

内标分为「内源性内标」和「外源性内标」，两者的分析比较如下表 [3]:

「外源性内标」可更好监测提取、扩增过程：

外源性内标是在扩增体系中的提前加入的「定量」核酸分子，扩增中 Ct 值的变化幅度较小（某产品内标 Ct 值为：30 ± 1），因此当外源性内标扩增 Ct 值明显变大时，提示核酸提取不足，或反应体系中存在抑制物等。

然而内源性内标是人体的管家基因，随着采集的人体细胞加入反应体系，扩增反应的 Ct 值较大时，可能的原因不仅包括核酸提取不足、反应体系中存在抑制物等，也可能是由于并未采集到足够的细胞。

扩增过程中，某样本内标的 Ct 值升高。

可能原因分析：

• 外源性内标：该样本核酸提取不足，或反应体系中存在抑制物
  
• 内源性内标：该样本核酸提取不足，或反应体系中存在抑制物，或未采集足量细胞

1 ~ 9 号样本

Ct 值：20.0 ~ 28.1

10 号样本

Ct 值：24.8

11~19 号样本

Ct 值：22.8~28.2

20 号样本

Ct 值：25.8

21 号样本

Ct 值：26.0