引言

    机体含有大量的水分，这些水和溶解在水里的各种物质总称为体液，体液可分为两大部分：细胞内液和细胞外液，存在于细胞内的称为细胞内液，约占体重的40%。存在于细胞外的称为细胞外液。细胞内液主要指细胞内的小分子的水、无机离子，中等分子的脂类、氨基酸、核苷酸，大分子的蛋白质、核酸、脂蛋白、多糖。细胞外液又可分为血液、尿液、组织间隙液（简称组织液或细胞间液）、淋巴液、脑脊液、胃肠道分泌液、精液、肺腔的液体、腹膜的液体等。因细胞内液难以采集，临床上主要通过对细胞外液的检测，为疾病诊断、治疗和预后提供科学依据。本章节主要就临床上应用最为广泛的血液诊断和尿液诊断的相关进展情况进行阐述。

一、血液与体液诊断领域技术和产品的国内外发展情况

（一）、血液分析流水线的逐步推广

近年来，随着检验医学的飞速发展，新技术和新方法的层出不穷，传统的检验项目也因为检验技术的进步而使得检测结果日益得到临床的信赖和认可。建设自动化实验室，吸引了越来越多的大中型医院的关注。由此推动了临床检验样本的大量增加，实验室每天要处理的样本量越来越多，尤其是一些三级医院，每天的样本数量都在万位数的级别，有的甚至达到数万，在这种情况下，单纯的依赖增加操作人员和检测仪器，扩大实验室规模等初级方式来应付大标本，不能从根本上解决问题，反而会产生新的问题，尤其是样本差错率、样本周转时间（test turn around time，TAT）、样本前处理的质量保证、检测结果的审核和复检等。

自2001年浙江大学第一医院引进国内第一条流水线至今，全国已安装300多条自动化流水线和前处理系统，说明全国体外诊断市场已经有了成熟和稳定的流水线客户和使用经验。各个企业已拥有成熟的流水线销售、支持和服务团队，并积累了丰富的经验。目前市场上常见的血液流水线品牌主要有：希森美康（Sysmex）、贝克曼库尔特(Beckman Coulter)、罗氏(Roche)、西门子（Siemens）、迈瑞（Mindray）等。

1、Sysmex XN系列血液分析流水线

Sysmex XN以先进的设计理念 为满足不同层次用户的使用需求，可根据用户要求灵活组合，真正实现了“X种客户需求，N种解决方案”，如图4-1。实现一键开机，简化了开机程序，解决了繁琐的开机步骤，消除了由开机不正确引发的各种故障。软件系统配备 XN系列使用了新的软件系统，操作界面更加简便，突出了人性化。增加新的检验模式和通道，满足不同标本的检测需求，不同检验模式和通道进行参数比对，使得结果更加准确。多种复检规则的联合使用，满足了不同标本的复检要求，预设了多种复检方案，大大降低了漏检率。关机与日常保养同时进行 省去了操作者较为繁琐的日常保养操作。 

XN-2000血液-体液一体机分析仪为是多功能、多参数、全自动血细胞分析仪器（如图4-2），该仪器应用流式细胞技术和电阻抗技术的双重原理进行血细胞计数，并可进行原始细胞、有核红细胞、幼稚细胞及血小板聚集、网织红细胞计数、临床开展的胸、腹腔积液常规分析中，有核细胞计数及分类是不可或缺的部分，对于判断渗出液与漏出液以及多种疾病的诊断、治疗和预后都有着重要的意义。传统的有核细胞计数及分类为显微镜法，此法虽为金标准，但操作繁琐且易受到人为主观因素影响,如能自动化检测，就可以在一定程度上解决上述问题。XN-2000血液-体液一体机分析仪不仅可以对血液标本进行检测,还提供了专门的模块来对体液中的有核细胞进行检测，现对其检测结果进行分析及评价等多种异常情况的报警和提示，具有检测速度快、样本少等优点。

2、贝克曼库尔特DxH系列血液分析流水线

DxH800血细胞分析仪采用最新的模块化设计理念，专为实验室的需求度量身做成不同的血细胞分析仪流水线组合。DxH800血细胞分析仪无需任何连接轨道即可灵活地与多台DxH800血细胞分析仪或DxH全自动推染片系统（DxH SMS）连接，组成血细胞分析流水线，如图4-3。同时，为提高流水线的检测效率，不同模块之间可智能地分配样本工作量。采用专利的磁力传输系统运送样本，有效地提高了样本的运转效率。通过一定的规则设定，无需人为干预对结果异常样本自动增加测试项目和重测功能。DxH800血细胞分析仪为立柜式结构，检测所配套的试剂可以摆放在位于仪器下方的试剂柜中，并具备实时的试剂追踪功能，方便实验室对试剂的管理。DxH800血细胞分析仪基于VCSn原理对“近于原始形态”的白细胞进行测量，所获得的反映细胞形态学变化的测量参数——白细胞群落参数（cell population data,CPD）增至56项，从而可以更精细地反映疾病状态下白细胞形态的变化。

图4-3 DxH系列血液分析流水线

DxH800血细胞分析仪支持体液细胞检测功能，并配有专用的体液质控品。可以对多种体液标本，包括脑脊液、浆膜腔积液、穿刺液、脊髓等进行细胞颗粒的检测，出报告体液红细胞计数（RBC-BF）、体液有核细胞计数（TNC-BF）参数外，还提供体液中多个核细胞百分比（%）和绝对值（#）、单个核细胞的百分比（BFM%）和绝对值（BFM#）及幼稚细胞的报警等。

3、迈瑞CAL 8000血液分析流水线

CAL 8000全自动样本处理系统与全自动血细胞分析仪、全自动推片染色机连接成流水线，实现血液样本的自动调度与分配、运输、回收、异常样本自动智能复检。该流水线可选择全自动血细胞分析仪、全自动推片机数量组合成不同测试速度层次的血细胞分析流水线，如选择4台BC-6800/BC-6900和2台SC-120组成CAL 8000 420流水线，样本处理速度可达500个样本/小时，如图4-4。该流水线具有待分析样本的试管架缓存功能、已分析完样本的试管架缓存功能、一键开机功能、触摸屏多自由度运动操作功能，用户戴手套也能方便灵敏地操作。该流水线能提供定制的质控专用试管架、推片专用试管架、网织红细胞专用试管架。试管架两侧和上端都有醒目标识，方便用户识别，快速查找样本。急诊样本可在装载平台快速插入，保证急诊样本得以优先、及时测试。提供机外试剂存储设备，可让用户在不停止样本检测的情况下，方便更换试剂。

图4-4 CAL-8000血液分析流水线

（二）、流式细胞术在二级以上医疗机构的推广

流式细胞术（flow cytometry,FCM）是利用流式细胞仪（flow cytometer）对血液、体液、骨髓、活检材料、石蜡包埋组织中的有形成分、动植物的单细胞悬液，包括细胞、血小板、精子、微生物、细胞器，以及人工合成微球等的多重生物和物理、生化特性进行计数和定量分析，并能对特定细胞群体加以分选的细胞参量分析技术。而流式细胞仪是集激光、单克隆抗体、紫外光等多光源、荧光染料、标记技术、计算机及分选仪器。同传统的荧光显微镜相比，流式细胞仪具有速度快、精度高、准确性好等特点，成为当代最先进的细胞定量分析技术。

自20世纪70年代以来，随着流式细胞技术水平的不断提高，其应用于范围也日益广泛。目前，运用流式细胞仪几乎可对各种组织来源的细胞及细胞亚群进行检测，包括各种细胞的细胞膜、细胞质及细胞核中各种蛋白分子的相对和绝对定量分析，细胞中染色体、DNA、RNA的定量等，可完成从细胞的某一种到多种生物学特征及功能的同时分析。临床流式细胞术虽然是一门新兴的检验技术，但是发展迅猛。流式细胞分析已逐渐成为推动临床医学发展的重要手段。目前国内二级以上医疗机构的临床实验室绝大多数已开展了流式细胞分析工作，并成为反映医院较高临床医疗与研究水平的标志。

目前国内外医学实验室使用的分析型流式细胞仪主要有：NaviosTM型、CytomicsTM FC500 MCL/MPL型（如图4-5）、FACSCaliburTM型（如图4-6型）、FACS CantoTMⅡ型、BriCyte E6、NovoCyte型，分选型流式细胞仪主要有：MoFlo XDP型、MoFlo AstriosEQ型和FACSAriaTMⅡ型。

图4-5 CytomicsTM FC500 MCL/MPL型流式细胞仪

图4-6 FACSCaliburTM型流式细胞仪

如今流式细胞术已经日益成熟，随着光电技术、计算机技术进一步发展，流式细胞仪已开始向模块化、经济型发展，即它的光学系统、检测器单位和电子系统更加集成化，并可按照实验要求进行灵活的调整和更换。此外，临床型的流式细胞仪还追求更加自动化的操作，包括自动化的样本处理及与LIS的双向通讯等。现在流式细胞术已成为肿瘤学、免疫学、血液学、细胞生物学、细胞遗传学、生物化学等临床医学和基础医学等领域中的重要工具。

（三）、网织红细胞检测逐步被重视

网织红细胞（Reticulocyte，RET）是尚未完全成熟的红细胞（如图4-7），在周围血液中的数值可反映骨髓红细胞的生成功能，因而对血液病的诊断和治疗反应的观察均有其重要意义。

图4-7 染色后的网织红细胞（图中含深蓝色点状细胞）

网织红细胞增高，(1)提示骨髓造血功能旺盛见于各种增生性贫血如缺铁性贫血、巨幼细胞性(缺乏叶酸、维生素B12)贫血、失血性贫血,尤以溶血性贫血时增加最为显着，网织红细胞百分比常在10%以上。(2)缺铁性贫血及巨幼细胞性贫血在给予铁剂、维生素B12、叶酸治疗之后,可见网织红细胞明显增加。

网织红细胞减低，提示骨髓造血功能低下，见于再生障碍性贫血、急性白血病。网织红细胞计数在诊断正常细胞贫血，或仅蛋白、转铁蛋白结果可以的小细胞时尤为重要；大细胞贫血伴网织红细胞增多，常提示用叶酸或维生素B12治疗有效。

目前仅在二甲及二甲级别的以上医院开展网织红细胞检测项目，而基层医疗机构迫于设备和技术人员的短缺，难以开展此项检查，然而医院分级诊疗已然成为趋势，基层医疗机构需要“独挡一面”，对能够检测网织红细胞的血细胞分析仪的需求日趋增强。优利特URIT系列五分类血细胞分析仪，运用多角度偏振光散射白细胞分类（mult-angle polatised scatter separation of white cell,MAPSS）技术，无需对细胞染色，采用纯物理的方法对白细胞进行精确的五分类，为国内首家采用此分类方法的机型。URIT五分类血细胞分析仪全系机型均具有网织红细胞检测功能（如图4-8），仅需一种网织红染液，就能检测提供3项网织红细胞检测参数，如图4-9。其他进口或国产五分类血细胞分析仪，仅在其高端机型才能具有网织红细胞的检测功能。 

图4-8 URIT系列五分类血细胞分析仪

图4-9 URIT系列五分类血细胞分析仪RET检测参数

（四）、血液常规分析(五分类)和CRP联合检测

人类C反映蛋白（C-reaction protein，CRP）是指在集体受到感染或组织损伤是血浆中的一些急剧上升的蛋白质（急性蛋白）。CRP可以激活补体和加强吞噬细胞的吞噬而起调理作用，从而清除入侵机体的病原微生物和损伤、坏死、凋亡的组织细胞，在机体的天然免疫过程中发挥重要的保护作用。关于CRP的研究已有70多年的历史，传统观点认为CRP是一种非特异的炎症标志物，但近十年的研究揭示了CRP与炎症、动脉粥样硬化等心血管疾病的发生相关，并且是心血管疾病最强有力的预示因子和危险因子。

随着预防性治疗和防止滥用药物的需求逐渐增加，临床上对于临床实验室的快速和准确诊断提出更高的要求。血液常规分析(五分类)和CRP联合检测是对细菌和病毒感染鉴别诊断的高性价比指标，连续监测对于术后感染其他炎症和恶性疾病的诊断和疗效监测具有重要意义。在脑膜炎、肺炎等感染性疾病的急诊治疗中，快速的白细胞五分类和CRP联合检测，可有效提升急救的成功率。细菌性和病毒性感染的治疗方案差别很大，因此，二者的鉴别诊断有重大意义。比如，细菌性感染时，中性粒细胞增加，CRP上升明显，而病毒性感染，淋巴细胞数值增加，但CRP未有明显变化。在心血管疾病预防方面，CRP在心血管事件发生的预示和治疗预后判断等方面有重要价值。CRP<1.Omg／L为低危险性；CRP1.0-3.Omg／L为中度危险性；CRP>3．Omg／L为高度危险性。

除了前述血液分析流水线具有血液常规分析(五分类)和CRP联合检测的功能，目前市面上具有能进行CRP检测的单台五分类血细胞分析仪有ABX Pentra MS CRP型（如图4-10）、迈瑞BC-5390CRP型、帝迈D7/D5 CRP型等。CRP的检测方法基本采用乳胶免疫比浊法，并通过标本对应的HCT值对CRP结果进行自动修正。

图4-10 ABX Pentra MS CRP型五分类血细胞分析仪