由新型冠状病毒（SARS-CoV-2）导致的肺炎COVID-19目前防控形势持续严峻，检测需求将可能进一步加大，甚至可能长期存在需求。针对新冠病毒的特异性抗体IgM/IgG检测试剂盒，对设备和人员要求低，适合大规模快速排查，起到了与PCR核酸检测法互相补充以提高诊断效果的作用。但应用实践中发现POCT类快检试剂盒存在不同厂家、不同批次的检测准确度差异较大的情况。作为POCT厂家如何以质求胜，关键看谁能够把控核心蛋白原料的安全性。

稳定批量生产高活性、高纯度的宿主抗原蛋白是制造高品质抗体检测试剂盒的关键。因为稳定的高纯度、高活性蛋白能特异性更强的结合血清中的抗体，从而降低假阳性的出现。而要大规模制备高稳定性的抗体检测试剂盒，就对核心蛋白原料供应商的批次供应能力和批间稳定性水平提出了更高的要求。

北京同立海源生物科技有限公司，作为十余年专业从事真核重组蛋白研究的“中国品牌”，自新冠疫情爆发以来，密切关注疫情发展态势，快速自主研发生产了新型冠状病毒（SARS-CoV-2）真核表达N蛋白、S1蛋白、S-RBD-Fc蛋白，为IVD试剂厂家提供性能优异的核心蛋白原料，助力全球抗疫。

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CHO稳定细胞株表达的新冠病毒S-RBD-Fc蛋白

同立海源生物的新冠病毒S-RBD-Fc蛋白采用CHO稳定细胞株表达，蛋白批次稳定性高，经还原SDS-PAGE和SEC-HPLC检测其纯度均达95%以上，业内领先。最快两周可实现单批次10g级生产，充分的产能保障是检测试剂盒厂家的良好可选合作伙伴。 

 图1 RBD蛋白SEC-HPLC

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经验证的HEK 293真核表达N蛋白

N蛋白作为核衣壳会保护病毒自身RNA——能够识别RNA并与之连接，并且可自结合成为低聚物外壳，对病毒粒子组装具有重要意义，常被作为冠状病毒诊断检测原料。

同立海源生物生产的N蛋白（重组SARS-CoV-2核衣壳蛋白）采用HEK293真核细胞表达，具备翻译后的修饰功能，其表达的重组蛋白更接近天然蛋白结构，有效避免了原核蛋白不正确折叠和存在的血清与抗原之间的交叉反应。经POCT试纸条的对比验证数据表明，其公司真核系统表达的重组蛋白抗原交叉反应少，假阳性率低，更加适合作为高精度抗体检测试剂盒的核心原料。

 图2 正常人血清的POCT试纸条的检测结果

通过ELISA实验检测SARS-CoV-2的N蛋白与抗体结合能力，获知蛋白活性高，

EC50＜0.5ng/ml。

图3 重组N蛋白与NP多抗的结合ELISA

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HEK 293真核表达S1蛋白，经验证生物学活性高

同立海源生物研发的SARS-CoV-2真核表达S1蛋白，经动物实验发现其对小鼠的病理改变与SARS-CoV-2极为相似，这不仅提示S1蛋白可能是SARS-CoV-2发挥作用的关键蛋白,而且通过在动物实验中发现重组S1蛋白在肺损伤中的作用，也证明了与天然S1蛋白有十分相似的生物学活性。

图4 对照组和实验组小鼠肺部形态
图5 对照组和实验组小鼠肺组织病理切片
由图可见对照组肺组织结构均匀完整，肺泡腔结构清晰，未见中性粒细胞浸润；实验组肺组织出现弥漫性出血情况，肺泡塌陷断裂融合，浆细胞、淋巴细胞、组织细胞聚集，可见少量中性粒细胞。（以上数据来源于湖州中心医院 孟志鹏）