帕金森病(Parkinson’s disease,PD)是一种常见的神经系统变性疾病,为老年人所多见。
DJ-1是帕金森病的典型生物标志物,该标志物及各种修饰异构体的检测定量对于临床诊断及治疗评估十分重要。但该蛋白及异构体的检测非常困难,传统方法基于双向电泳及液质联用,重复性差,定量困难,动态范围低等,因此限制了该疾病的深入研究。
美国Protein Simple公司生产了一种名叫NanoPro1000的全新检测平台,通过毛细管等点聚集技术,成功定量检测到脑样品中各种复杂DJ-1异构体。技术上,NanoPro1000采用革新的毛细管等点聚焦技术,DJ-1在两性电解质中进行自动化电泳,不同的修饰异构体根据各自等电点得以分开,然后利用通用抗体进行杂交识别,进而实现不同异构体的检测及定量。整个平台自动化程度高,放置样品及抗体后整个系统自动运行,直至产生最终结果,克服了众多人工步骤所导致的重复性及重现性差等缺点;检测通量高,最高可达96个样品/次,因此适合检测大量不同处理设计后的样品,如对照组与处理组,处理组的不同剂量等;另外,系统的S/N值及动态范围都比较宽,能以较强的稳健性进行差异悬殊的样品间定量比较。
而在实验设计上,在高脂饮食下,帕金森病DJ-1在小鼠脑组织及人脑脊液中的各修饰异构体的表达量变化。揭示出DJ-1的某些异构体峰在高脂饮食下与对照组存在显著的差别。因此,这些异构体峰可作为潜在的早期临床诊断、疾病分型或治疗评估指标。
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