背景：血小板是一种小血细胞，在止血、炎症和免疫中发挥着重要作用。全面分析血小板表型和功能的能力对于心血管研究和血小板疾病的临床诊断都非常重要。流式细胞术允许在生理条件下使用少量全血对血小板进行研究。流式细胞仪技术的最新进展，如质谱细胞仪和光谱细胞仪，可同时分析单个血小板的十几个参数，提供丰富的多变量信息。然而，已发表的方案很少充分利用这些多参数技术。

Spurgeon BEJ等人在Cytometry A上介绍了一种新型的 16 色流式细胞仪方案，用于对人类血小板进行多参数表型分析。该方案可灵敏识别与止血、炎症和免疫相关的各种血小板亚群。它在以前的血小板流式细胞仪方案的基础上，加入了磷脂酰丝氨酸、C3b、CD32 和 TLR9 等新型标记物以及已有的活化标记物。

作者优化了一套方案，可对柠檬酸化全血中的新鲜血小板进行染色，然后在 2 小时内进行裂解/固定和采集。经过广泛验证，确保了技术可靠性。该方案包含以下内容：

•磷脂酰丝氨酸，用于识别促凝血小板

•CD62P、PAC-1、CD63、CD107a、CD154 和 TLT-1 等活化标志物

•C3b、CD32 和 TLR9 等新标记物

•组成型受体，如 CD29、CD31、CD36 和 GPVI

FAUST自动设门显示了四个主要亚群：促凝、促聚集、促炎和静息血小板。双变量图和直方图总结了不同亚群的标记物特征。样本在 24 小时后会出现一些荧光衰减。

总之，多参数流式方案可鉴定临床相关的血小板表型，开放式通道设计可根据特定研究需求进行定制。在经过优化和验证的程序之后，可广泛用于心血管研究和临床诊断中的血小板生物学研究。新型标记物的创新应用和自动化分析为利用新兴的细胞测量技术提供了一个范例。

参考文献：

Spurgeon BEJ, Frelinger AL 3rd. OMIP-097: High-parameter phenotyping of human platelets by spectral flow cytometry [published online ahead of print, 2023 Oct 3]. Cytometry A. 2023;10.1002/cyto.a.24797. doi:10.1002/cyto.a.24797