新一代糖化血红蛋白（HbA1c）即时检验（POCT）仪器 —— 澳菲领（Afinion），具备美国国家糖化血红蛋白标准化计划（NGSP）和国际临床化学联合会（IFCC）双重认证，在欧美主要发达国家已得到广泛使用和认可。但由于国情和人群不同，国内检验和临床学界对HbA1c能否用POCT仪器精确测定并达到质评要求仍存有疑虑。

为此，Axis-Shield有限公司（以下简称AS）委托上海、天津、广东、南京等四个地区的多家医院，对Afinion仪器和配套HbA1c试剂分别做了独立的第三方评估，得出了几乎一致的结论：Afinion是理想的HbA1c POCT仪器，值得在国内临床推广。 

目的

用Afinion仪器和配套HbA1c试剂检测国内不同地区、不同人群HbA1c样本，评估其准确性、精密度，以及与实验室经典高效液相色谱法（HPLC）的相关性。 

方法

2011年2月至8月，在上海、天津、广东、南京等四个地区的多家医院使用8台Afinion仪器及不同批次HbA1c试剂检测各地人群全血样本，共计324份，均涵盖HbA1c低、中、高值，分别独立研究、评估与实验室经典HPLC方法的相关性，具体见表1。

表1

评估地区	代表单位	样本数量（份）	对比仪器及原理	相关性分析方法
上海	上海交通大学附属第一人民医院内分泌科	60	BioRad Variant II (离子交换HPLC法) Primus Ultra 2  (亲和层析HPLC法)	线性回归分析
天津	天津医科大学代谢病医院检验科	120	TOSOH G7（离子交换HPLC法）	线性回归分析
广东	中山大学第三附属医院内分泌科	82	Bio-Rad D10（离子交换HPLC法）[注：医院和第三方仪器各1台]	方差分析和两两比较（Bonferroni法）
南京	南京同仁医院检验科	62	Bio-Rad D10（离子交换HPLC法）	线性回归分析

 

此外，上海、天津和南京地区还对Afinion HbA1c检测的精密度作了研究和评估；广东地区对标本冷藏（2-8℃，7天）是否影响Afinion HbA1c检测作了研究和评估。

结果

1、四地区Afinion HbA1c检测与实验室经典HPLC方法的相关性评估结果见表2。

表2

评估地区	相关性分析方法	结果描述
上海	线性回归分析	r =0.986  ( BioRad Variant II)   r =0.990  ( Primus Ultra 2)
天津	线性回归分析	r =0.9888  (TOSOH G7)
广东	方差分析和两两比较（Bonferroni法）	方差分析P值为0.06，两两比较P值分别为0.392和0.057  (Bio-Rad D10)
南京	线性回归分析	r =0.989   (Bio-Rad D10)

 

2、精密度评估结果：三地区的精密度评估结果见表3。

表 3

评估地区	低值			高值
	批内	批间	日间	批内	批间	日间
上海	2.22%	∕	∕	1.29%	∕	∕
天津	1.56	∕	2.39	1.36	∕	1.82
南京	0.9	1.7	∕	1.1	1.9	∕

 

3、其他结果：标本冷藏前后Afinion HbA1c的检测结果无差异（广东地区），配对t检验P值均大于0.05。

结论

Afinion及配套HbA1c检测试剂具有良好的准确性和精密度，批内、批间、日间CV在0.9 % ~ 2.5%间，与实验室经典HPLC方法相关性好，是理想的HbA1c检测仪器。 

讨论

因人口和国情关系，目前国内临床检验仍以大型仪器和设备为主，而美国40%的检验在非传统实验室完成。随着基层医疗条件的改善，以及高端医疗和部分研究需要推动的对分散检测的需求^[1]，近年来国内POCT仪器在体外诊断市场的占比也在不断上升。

HbA1c作为糖尿病筛查、诊断和血糖控制的有效指标，在临床已得到广泛应用。临床实验室中应用的HbA1c检测方法主要分为两大类：一类方法基于糖化血红蛋白与非糖化血红蛋白的电荷不同，如离子交换色谱、电泳和等电聚焦方法；另一类方法基于血红蛋白（Hb）上糖化基团的结构特点，如亲和层析和免疫方法。对临床实验室而言，商用的HbA1c检测仪器尚无公认的"金标准"。于上世纪70年代出现并发展起来的离子交换HPLC法，虽会受到Hb变异体和衍生物的影响，但仍被国内部分医疗机构认为是HbA1c检测的"标准方法"，代表性产品有Bio-Rad、TOSOH等公司的相关产品。上世纪80年代出现的亲和层析法，通过检测所有被糖化的Hb而客观反映HbA1c的真实水平，特异性更强，且不受糖化血红蛋白变异体、衍生物和中间体（Schiff’s碱）的干扰。NGSP在2009年将Hb变异体对常见HbA1c检测仪器（按检测原理分类）的影响以表格方式公布在其官方网站上，同时含有该表格的文章也公开发表在"Journal of Diabetes Science and Technolog "杂志上，结果表明：Axis-Shield和Primus公司的相关产品作为亲和层析法的代表，不受常见Hb变异体的干扰^[2]。

2007年美国糖尿病学会（ADA）、欧洲糖尿病研究协会（EASD）和国际糖尿病联盟（IDF）三大国际组织达成共识，确定了IFCC参考系统是唯一能够满足标准化要求的方法^[3]。2009年10月，ADA、 EASD、 IDF、 IFCC和 ISPAD五大国际组织召开第二次共识会议，推荐HbA1c的报告单位为mmol/mol（IFCC），%（NGSP），mmol/L（eAG）^[4]。国内HbA1c检测的标准化工作尚不尽如人意，一般大型医疗机构的实验室多采用HPLC法检测HbA1c 以满足标准化要求，但这些仪器无法按照五大组织的推荐、同时报告上述3种单位。

为顺应分散检测的趋势，各检验公司陆续推出了HbA1c检测的POCT仪器，但迄今为止，绝大多数检测HbA1c的传统POCT仪器尚难以达到国际标准化要求^[5]。AS于2005年研发出新一代HbA1c POCT仪器 —— Afinion，并陆续推出配套试剂，顺应了上述趋势。Afinion HbA1c检测项目是为数不多的同时满足NGSP标准化和五大国际组织要求的HbA1c检测仪，可以同时报告上述3种单位，溯源到IFCC参考系统，其良好的精密度已被多家国外权威第三方机构评估证实。Afinion HbA1c检测项目由两家国际权威实验室Queen Beatrix Hospital（WinterswijkIsala）和Isala Klinieken（Zwolle）提供校正样本、监控校正过程并给予年度认证。这两家实验室同时是IFCC网络的核心参考实验室、NGSP二级参考实验室和Hb变异体的国际参考实验室。Afinion在欧美国家上市后，实际的临床表现稳定，完全符合HbA1c标准化检测要求。美国病理家协会(CAP)于2011年4月公布了常见HbA1c检测仪器精密度的评估结果（根据ADA推荐，用新鲜全血样本，参考7个NGSP二级实验室方法）：Afinion表现优秀，低、中、高值样本的平均CV约为2.7%。此前，CAP于2010年公布的部分质评结果见图1（NGSP靶值为8%），可以看到包括Afinion在内的HbA1c POCT仪器的总体表现要明显优于实验室自动生化仪，这也是检验发达国家将HbA1c检测由自动生化仪转移至专业的HbA1c检测仪器（包括HPLC和POCT仪器）的原因和依据。

本次Afinion HbA1c检测项目国内多地区多中心独立研究评估的结果同样优异，各中心报告的批内、批间及日间CV在0.9 % ~ 2.5%之间，与实验室经典HPLC法相关性好，完全能够满足HbA1c的标准化检测要求，实现了对国内人群HbA1c样本的精确测定，且操作简便，是理想的HbA1c POCT仪器。据悉，Afinion HbA1c检测项目获得了FDA CLIA Waived认证，可以由非专业实验室的人员操作而不影响结果的准确性，适用指尖血和各种抗凝静脉血标本，3分钟即可获得报告，大大方便了临床科室的应用。

    Afinion的优势还在于可以检测ACR（尿微量白蛋白、尿肌酐及比值）等多个项目。而ACR是NKF（美国肾脏基金会）、ADA等最新权威指南推荐的做慢性肾病（包括糖尿病肾病，DKD）早期筛查的优先检验指标^[6，7]。因此，Afinion可以为糖尿病及其并发症的诊治提供整套检验解决方案。

参考文献

[1] Kalorama Information. Worldwide Point-of-Care Testing: Are Decentralized Clinical Diagnostics a Cost Drain or Revenue Driver. Nov, 2006.

[2] Randie R. Little, Ph.D., William L. Roberts, M.D., Ph.D..Author Journal of Diabetes Science and Technology. May 2009, Vol. 3, Issue 3.

[3] Consensus Committee. Diabetologia. 2007, 50(10): 2042.

[4] International Expert Committee. International Expert Committee report on the role of the A1cassay in the diagnosis of diabetes. Diabetes Care. 2009, 32:1327-1334.

[5] Erna Lenters-Westra, Robbert J. Slingerland. Six of Eight Hemoglobin A1c Point-of-Care Instruments Do Not Meet the General Accepted Analytical Performance Criteria. Clinical Chemistry 2010, 56: 1, 44–52.

[6] KDOQI Clinical Practice Guidelines and Clinical Practice Recommendations for Diabetes and Chronic Kidney Disease. American Journal of Kidney Diseases. February 2007, Vol 49, No 2, Suppl 2: S17.

[7] American Diabetes Association. Standards of medical care in diabetes - 2010. Diabetes Care, 2010, 33 (supplement 1).