检验指标解读 | 酸性磷酸酶染色、铁粒染色、氯乙酸AS-D萘酚酯酶染色、非特异性酯酶染色
更新时间:2022/5/17 23:11:06 浏览次数:8217酸性磷酸酶染色
(acid phosphatase stain,ACP)
正常值
细胞质内出现紫红色颗粒为阳性。
正常粒细胞除原粒阴性外,其余各阶段呈弱至中度阳性,单核细胞为弱至强阳性,红系为阴性,淋巴细胞可呈弱阳性,浆细胞和巨核细胞可呈中度阳性,网状细胞、吞噬细胞、组织嗜碱性细胞可呈阳性。
影响因素
1. 血液细胞内酸性磷酸酶的反应最佳pH为4. 5~5. 5,由于方法不同,工作液的配置须用酸度计进行测定,以免阳性强度受影响,甚至无阳性出现。
2. ACP染色结果以弥散状阳性出现的细胞较多。如为弱阳性反应,在复染时应注意在涂片纵向复染一半,另一半不复染,以利弱阳性的观察。
临床解读
1. 帮助诊断毛细胞性白血病
毛细胞性白血病可呈较强的阳性反应,且不被L-酒石酸所抑制,淋巴瘤细胞和慢性淋巴细胞白血病淋巴细胞ACP染色也呈阳性反应,但被L-酒石酸所抑制。
2. 鉴别T淋巴细胞和B淋巴细胞
前者呈阳性反应,后者阴性。
3. 鉴别细胞
鉴别戈谢细胞和尼曼-匹克细胞,前者强阳性,后者阴性。鉴别浆细胞、多发性骨髓瘤与异常淋巴细胞,前者呈阳性或强阳性,后者呈阴性。
铁粒染色
(iron granules staining)
正常值
骨髓铁可染成蓝色颗粒、小珠及小块。
细胞外铁正常为(十)~(十十)。
细胞内铁正常阳性率为0. 12~0. 44,细胞质内常见1~5个铁染色颗粒。
影响因素
(1)标本取材要满意。外铁检查要选择含有骨髓小粒的涂片。
(2)所用玻片一定要清洁无污,需经无铁处理,除去载玻片上可能存在的污染铁,此点对外铁检测特别重要。
(3)试剂要新鲜配置,浓盐酸与亚铁氰化钾的比例要准确。
(4)最好用放骨髓液的原片做铁染色,观察时要仔细。
(5)细胞内铁计算积分时以中晚幼红为准,原红和早幼红不计入百分比内。
临床解读
1. 诊断缺铁性贫血
细胞外铁减低或消失,细胞内铁在缺铁早期不减少或轻度减少,重症贫血时,内铁明显减少甚至为阴性。经铁剂治疗有效后,外铁迅速增加。
2. 诊断铁粒幼细胞性贫血
出现环形铁粒幼细胞量增多,常>15%,细胞外铁增多。
3. 非缺铁性贫血
临床常见的有,溶血性贫血、巨幼细胞贫血、再生障碍性贫血、骨髓增生异常综合征、白血病等,均可引起细胞内外铁的增多。感染、肝硬化、慢性肾炎、尿毒症及多次输血者骨髓外铁增加。
氯乙酸AS-D萘酚酯酶染色
(naphthol-AS-D chloracetateesterase stain, AS-DCE)
正常值
阳性反应为细胞质中出现红宝石色颗粒。中性粒细胞(除原粒细胞外)可呈阳性反应,但酶活性并不随细胞成熟而增强。嗜酸性和嗜碱性粒细胞为阴性,嗜碱性细胞偶可呈弱阳性。肥大细胞有时可呈阳性反应。巨核细胞、淋巴细胞、浆细胞、幼红细胞、血小板为阴性。
影响因素
(1)标本必须新鲜,取材后如无法及时染色可先行固定。
(2)氯化醋酸萘酚酯酶(NCE)最佳反应pH为7. 0~7. 6。
(3)严格遵守操作规程,若温度升高和pH增加可导致氯化醋酸萘酚水解,从而在细胞内产生明显的非特异性酯酶反应。
临床解读
1. 用于鉴别急性白血病类型
急性粒细胞白血病大多呈阳性反应,急性单核细胞、淋巴细胞白血病时呈阴性,急性粒-单细胞白血病部分(原粒和早幼粒细胞)呈阳性,部分(原单核细胞和幼单核细胞)呈阴性。
2. 鉴别嗜碱性粒细胞与肥大细胞
前者阴性,后者阳性。
非特异性酯酶染色
(nonspecific esterase stain)
常用非特异性酯酶有α-乙酸萘酚酯酶(α-naphtholacetateesterase, α-NAE)、醋酸AS-D萘酚酯酶(naphtholAS-Dacetateesterase,AS-DAE)、α-丁酸萘酚酯酶(α-naphthol butyrase esterase, α-NBE)等。
正常值
细胞质中出现棕黄色颗粒为阳性。在单核细胞、吞噬细胞中此类酶的含量较多且多数受到氟化钠(NaF)抑制;粒细胞、淋巴细胞、部分幼红细胞、巨核细胞和血小板等呈阴性,如有阳性,则不被NaF抑制。
影响因素
1. 酶的活性随标本采集后的时间而逐渐下降,应取材2d内染色。
2. α-NAE最佳反应pH为6. 0~6. 3。
3. 染色时间和温度要相对恒定。
4. 各种基质试剂由于其产品衍生物较多,染色效果可随产地、生产厂商及批号不同等因素相差甚远,所以每次操作应设阴、阳性对照。
5. 在酯酶染色反应中切忌基质浓度过高,以防引起背景污染,冲洗困难,特别在冬天,易使涂片表面产生脂质沉淀,影响结果观察。
临床解读
1. 非特异性酯酶又称单核细胞酯酶,主要存在于单核细胞和组织细胞内,正常单核细胞各阶段均呈阳性,且可被氟化钠抑制。
2. 急性粒细胞白血病可呈阳性或弱阳性,急性早幼粒细胞白血病细胞呈强阳性,但不被氟化钠抑制。
3. 急性淋巴细胞白血病一般为阴性。

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